Test antinuklearnih antitijela (ANA) koristi se kao primarni test za procjenu bolesnikova stanja autoimunih poremećaja vezivnog tkiva. To su poremećaji koji zahvaćaju mnoga tkiva i organe u cijelom tijelu. Što pokazuju rezultati ispitivanja? Što su ANA? Koje se bolesti mogu otkriti ANA?
Sadržaj:
- ANA test - što su antinuklearna antitijela?
- ANA test - uporaba u dijagnostici
- ANA test - prisutnost ANA u krvi zdravih ljudi
- ANA test - što je ime?
- ANA test - kada treba napraviti ANA test?
ANA kratica dolazi od engleskog naziva anti-nuklearna antitijela, što se u poljski prevodi kao "antinuklearna antitijela". Te molekule pripadaju proteinima zvanim autoantitijela, a to su proteini koji napadaju tijelo koje ih proizvodi.
ANA test - što su antinuklearna antitijela?
Ljudsko tijelo ima mnogo obrambenih mehanizama od patogena. Jedan od njih je humoralni imunitet. Temelji se na proizvodnji zaštitnih antitijela. U zdravih ljudi imunološki sustav stvara antitijela protiv stranih antigena.
Međutim, ponekad postoje situacije u kojima se stvaraju autoantigeni koji su usmjereni protiv proteina u našem vlastitom tijelu. Taj je postupak važan za genezu autoimunih bolesti.
Antinuklearna antitijela napadaju proteine i druge molekule koje čine jezgru.
Postoji mnogo različitih vrsta ANA. Razgradnja ovih antitijela temelji se na vrstama nuklearnih komponenata protiv kojih su usmjerene ove molekule. Ovisno o vrsti, ANA se mogu vezati i za pojedinačne proteine i za složene komplekse.
Primjerice, postoje antitijela protiv nuklearnih kanala i histona, tj. Molekule na koje je namotana DNA.
Napadajuće ANA se mogu razlikovati:
- GIHT
- histoni
- ribonukleoproteini
- Nuklearna RNA
- nehistonski proteini
Sve navedene komponente karakteristične su za staničnu jezgru.
ANA su prisutne u krvi tijekom svih vrsta bolesti. To uključuje autoimune poremećaje, rak i neke vrste infekcija. To omogućuje upotrebu antinuklearnih antitijela u dijagnozi određenih stanja bolesti.
ANA test - uporaba u dijagnostici
ANA test koristi se za otkrivanje antinuklearnih autoantitijela u krvi pacijenta. Ovaj pregled važan je za dijagnozu bolesti kao što su:
- sistemski eritematozni lupus
- Sjögrenov sindrom
- sklerodermija
- polimiozitis
- dermatomiozitis
- autoimuni hepatitis
- kotrljanje izazvano reakcijom na lijek
Pozitivan rezultat ANA testa dijagnostički je samo ako postoje klinički znakovi koji ga potvrđuju. Ispitivanje antinuklearnih antitijela također može biti korisno za praćenje napredovanja bolesti.
Tipični testovi koji se koriste za otkrivanje i procjenu ANA su:
- neizravna imunofluorescencija
- ELISA-enzimski test imunosorbenta
Metoda neizravne imunofluorescencije
Neizravna imunofluorescencija jedan je od najčešće korištenih ANA testova. Tipično, ovaj test koristi Hep-2 stanice. Nanose se u obliku tankog sloja na dijapozitive mikroskopa. Zatim se na njih stavi serum prikupljen od pacijenta i inkubira zajedno s Hep-2 stanicama.
Ako su ANA prisutne u uzetom uzorku, otkrivaju se nakon razdoblja inkubacije u obliku povezanom s antigenima u staničnoj jezgri. To se može vidjeti dodavanjem fluorescentne oznake koja se veže na antitijela.
U tu se svrhu najčešće koriste fluorescein ili rodopsin B izotiocijanat (FITC) ili rodopsin B. Molekula fluorescira kad joj je izložen snop svjetlosti određene valne duljine. Za promatranje i procjenu fluorescencije koristi se mikroskop.
U HEp-2 stanicama mogu se primijetiti različiti obrasci fluorescencije, ovisno o vrsti antitijela prisutnom u ljudskom serumu i lokalizaciji antigena. Njihova analiza omogućuje utvrđivanje vrsta antitijela prisutnih u uzorku.
Razina antitijela određuje se serijskim razrjeđivanjem krvnog seruma. ANA test se smatra pozitivnim ako se fluorescencija primijeti na titru 1: 40/1: 80. Međutim, rezultat iznad 1: 160 je od značajne dijagnostičke važnosti.
Enzimski imunološki test (ELISA)
Enzimski imunološki test (ELISA) koristi mikrotitarske pločice s antigenima za otkrivanje ANA. Svaka jažica ploče presvučena je jednim ili više antigena. To služi za otkrivanje specifičnih antitijela.
Serum krvi se inkubira u jamicama ploče, a zatim ispere. Ako su u uzorku bila prisutna antinuklearna antitijela, nakon pranja ostat će vezana za odgovarajuće antigene na mikrotitarskoj ploči.
U sljedećem koraku ispitivanja, u jažicu ploče dodaje se drugo enzimom vezano antitijelo. Enzimska reakcija uzrokuje da otopina promijeni boju.
Razlika u boji proporcionalna je količini antitijela vezanih na antigen u jamici ploče. Boja dobivene otopine može se procijeniti spektrofotometrijskom metodom, tj. Mjerenjem intenziteta zrake svjetlosti koja se prenosi kroz otopinu.
ANA test - prisutnost ANA u krvi zdravih ljudi
Procjenjuje se da su u 5% ljudske populacije antinuklearna antitijela prisutna u krvi u koncentraciji koja se smatra dijagnostički relevantnom, bez obzira na prisutnost bolesnog stanja.
Kako se učestalost ANA povećava s godinama, čak 10-37% zdravih ljudi starijih od 65 godina testira na prisutnost ANA. Takvi su slučajevi češći u žena nego u muškaraca.
ANA test - što je ime?
Karakteristična vrijednost za ANA test je titar. Označava stupanj razrjeđenja seruma pri kojem antinuklearna antitijela postaju neotkrivena. Što je veća koncentracija ANA u krvi, to je veći titar prisutan u rezultatima ispitivanja.
Test specifičnosti antinuklearnih antitijela preporučuje se ako je titar veći od 1: 160. Te dodatne testove treba provesti zajedno s pacijentovom analizom kliničke povijesti i fizičkim pregledom. Svrha ovih koraka je dijagnosticirati ili isključiti autoimune poremećaje.
Treba, međutim, napomenuti da se takav rezultat javlja kod 5% bolesnika, bez obzira na stanje bolesti. Rezultat testa je dijagnostički samo ako postoje drugi simptomi bolesti.
Negativan rezultat ANA testa ukazuje na to da malo vjerojatno da pacijent ima lupus ili neku drugu autoimunu bolest.
ANA test - kada treba napraviti ANA test?
ANA test se nalaže kada simptomi pacijenta ukazuju na sistemski autoimuni poremećaj. Mogu biti vrlo nevidljivi i nespecifični, a mogu se mijenjati s vremenom.
Primjeri simptoma uključuju:
- Groznica niskog stupnja
- Trajni umor
- Bol nalik artritisu
- Crveni osip
- Osjetljivost kože na svjetlost
- Gubitak kose
- Bolovi u mišićima
- Utrnulost ili trnci u rukama ili nogama
- Upala organa i tkiva (bubrezi, pluća, srce, sluznica srca, središnji živčani sustav ili krvne žile)
Književnost:
- https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
- "Predmeti medicinskih predmeta". Nacionalna medicinska knjižnica. 12. veljače 2013.
- "Test antinuklearnih antitijela: što to znači". Američka zaklada Lupus. Pristupljeno 7. 6. 2013
- Kumar, Y; Bhatia, A; Minz, RW (2. siječnja 2009.). "Antinuklearna antitijela i njihove metode otkrivanja u dijagnozi bolesti vezivnog tkiva: ponovno putovanje". Dijagnostička patologija
- www.autopróbciala.info
- Kavanaugh, Arthur, Tomar, Russell, Reveille, John, Solomon, Daniel H. i drugi. Smjernice za kliničku uporabu testa antinuklearnih antitijela i testovi za određena autoantitijela na nuklearne antigene. Arhiv za patologiju i laboratorijsku medicinu. 124 (1), str. 71-81, siječanj 2000
Pročitajte više od ovog autora